Agar Plakları Nasıl Hazırlanır?

Agar plakları, mikroorganizmaların kültürlenmesi ve gözlemlenmesi için kullanılan besiyerleridir. Mikrobiyoloji laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılan bu plaklar, steril ortamda hazırlanmalı ve uygun şekilde saklanmalıdır. Agar plaklarının doğru hazırlanması, sağlıklı ve güvenilir sonuçlar elde etmek için kritik bir öneme sahiptir.

1. Gerekli Malzemeler

Agar plaklarını hazırlamak için aşağıdaki malzemeler gereklidir:

• Besiyeri tozu (örneğin, Nutrient Agar, LB Agar, MacConkey Agar vb.)
• Saf su veya distile su
• Steril petri kapları
• Manyetik karıştırıcı ve ısıtıcı
• Erlenmeyer flask veya beher
• Otoklav veya basınçlı sterilizasyon cihazı
• Laminar akış kabini veya alev kaynağı (Bunsen brülörü)

2. Agar Çözeltisinin Hazırlanması

1. Agar besiyeri tozunu ölçün: Üretici talimatlarına uygun olarak belirli miktarda agar tozunu tartın. Genellikle 1 litre çözelti için 15-20 gram agar kullanılır.
2. Su ile karıştırın: Ölçülen agar tozunu, belirlenen miktarda saf su veya distile su ile karıştırarak erlenmeyer flask içinde homojen hale getirin.
3. Isıtma ve çözme: Karışımı manyetik karıştırıcı veya düşük ateş üzerinde yavaşça ısıtarak agarın tamamen erimesini sağlayın. Kaynama noktasına gelene kadar ısıtın ancak taşmasını önleyin.
4. Sterilizasyon: Agar çözeltisini otoklavda 121°C’de, 15 psi basınç altında 15-20 dakika sterilize edin.

3. Petri Kaplarına Dökme İşlemi

1. Steril Ortam Sağlayın: Dökme işlemi sırasında, laminar akış kabini veya Bunsen brülörü alevi yanında çalışarak steril bir ortam oluşturun.
2. Agarı Soğutun: Otoklavdan çıkan sıcak agar çözeltisini yaklaşık 45-50°C’ye kadar soğuması için bekletin. Çok sıcak dökülmesi, besiyerinin bozulmasına neden olabilir.
3. Petri Kaplarını Doldurun: Her bir petri kabına yaklaşık 15-20 mL agar çözeltisi dökün. Fazla veya eksik dökülmesi yüzey yapısını bozabilir.
4. Katılaşmasını Bekleyin: Dökülen agarın oda sıcaklığında tamamen katılaşmasını bekleyin.

4. Saklama ve Kullanım

• Agar plakları hemen kullanılmayacaksa, ters çevrilerek (+4°C) buzdolabında saklanmalıdır.
• Kullanımdan önce, kontaminasyon olup olmadığını kontrol edin.

Agar plaklarının doğru hazırlanması, mikrobiyolojik çalışmaların başarılı olması için oldukça önemlidir. Sterilizasyon ve hijyen kurallarına dikkat edilmesi, güvenilir sonuçlar elde etmek için gereklidir.